Определение сроков вязки. Поведение, мазки и прогестерон.

Планирование вязок племенных сук. 

Зачастую заводчики, профессионально занимающиеся разведением собак, планируют вязку племенной суки заранее, поскольку предполагаемый кобель -отец живет за сотни километров. Часто владельцу племенной суки необходимо заплатить за вязку с выбранным кобелем в день спаривания, а потому заводчику важно быть уверенным в том, что будет положительный результат.  Неверно выбранное время вязки является основной причиной, по которой сука остается "пустой". 

 

Существуют несколько методов определения оптимального времени вязки сук:

• Определение по внешним признакам и поведению собаки
• Цитология влагалищных мазков – метод, который позволяет оценить изменение внешнего вида эпителиальных клеток влагалища под действием полового гормона эстрадиола. Это наиболее распространенный метод.
• Исследование уровня прогестерона в плазме крови суки. 

Определение по внешним признакам и поведению собаки.

•  Самое главное не пропустить начало «течки» - это период, когда происходят кровянистые выделения. В первые дни их можно заметить только утром, например на белой подстилке или на снегу. Но самый хороший способ – это когда живет ещё и кобель, он то точно не пропустит эти дни. Начинает нюхать промежность суки, а в местах испражнений лизать мочу, а потом перекрывать своей. Сама сука начинает "метить" - часто присаживаться по малой нужде, мелкими порциями.
• Через период в 7-15 дней ( у каждой суки индивидуально), выделения светлеют, а потом прекращаются. При этом «петля» становиться больше и немного поднимается вверх. Наступает период «половой охоты» - сука начинает беспокойно себя вести, становиться несколько подвижной, уши поднимает вверх, значительно чаще происходят испражнения мочи (если живет в квартире, то проситься гулять ночью), причем в те места где были испражнения др. собак. Рекомендуется положить руку на спину у основания хвоста – она должна отвести хвост в сторону, но не всегда это происходит. При поглаживании в промежности – петля поднимается вверх. Тем не менее это не означает, что она готова к вязке именно в этот день. Для того чтобы определить наверняка, можно живя в мегаполисе провести проверку на небольшом кобельке, подвести её к нему и если при соприкосновении с ним она отводит хвост в сторону, «петля» опускается вниз, а сама она немного приседает, горбя спину – то это означает, что она готова к вязке.

Цитология влагалищных мазков 

Для определения благоприятных дней вязки с помощью влагалищных мазков необходимо иметь:

•  Микроскоп с увеличением от 50 ( вполне подойдет даже самый простой-школьный )
• Предметные стеклышки - на них наносится мазок . Такие стеклышки часто продаются вместе с микроскопом.
• Дистилированная вода . Можно купить в аптеке или использовать кипяченую. 
• Ватные палочки.
• Краситель- метиленовый синий, продается в зоомагазинах для аквариумов, а можно пользоваться штемпельной краской – продается в канцелярских товарах, эффект одинаковый). Некоторые покупают в аптеке фукорцин для прокрашивания, тогда мазки будут не синеватого, а красноватого цвета. Также можно обычной зеленкой -бриллиантовый зелёный.

Как приготовить мазок.

1. Приготовить чистое предметное стеклышко, хорошо вымытое и протертое досуха.
2.  Взять ватную палочку, окунуть ее в дистиллированную воду, встряхнуть палочку в руке несколько раз, чтобы убрать лишнюю воду.
3. Влажной палочкой взять мазок с верхнего свода петли. Аккуратно , как бы протирая изнутри , засунув ватную палочку примерно на 1-3 см.
4. Равномерно прокатить ватной палочкой по предметному стеклу не сильно нажимая, чтобы слой мазка не был толстым
5. Подсушить мазок 1-2 минуты , после чего нанести на него одну-две капли красителя пипеткой.

Немного теории.

Парабазальная клетка - небольшие по размеру , округлые, с крупным ядром , достигающим почти половину размера клетки. Парабазальные клетки На фото видны лейкоциты ( мелкий песок ) и эритроциты - более крупные, округлые клетки

Промежуточная клетка - гладкие, округлые или овальные, имеют неровные очертания и содержащее везикулы ядро, которое меньше, чем ядро парабазальных клеток. Размер этих клеток весьма разнообразен. Они могут быть немного крупнее парабазальных, а могут превышать по величине клетки в 2 раза. Цитоплазма более светлая . Промежуточные клетки

Поверхностные клетки -это мертвые клеточные элементы, которые выстилают влагалище сук во время эструса. Это самые крупные из обнаруживаемых во влагалищных мазках клетки. Они имеют заостренную форму, угловатые контуры цитоплазмы и мелкие, сморщенные, частично лизированные ядра или вообще не содержат ядер. Так же часто эти клетки называют "полностью ороговевшими" или "полностью кератинизированными клетками" Эстральные чешуйки выстраиваются в цепочки (склеивание), но у некоторых сук склеивания не происходит, но оплодотворение наступает. Клетки как бы перекрывают друг друга(подобно черепице), расположены перпендикулярно друг к другу, контуры одной клётки легко просматриваются сквозь прозрачную цитоплазму другой . Поверхностные клетки

Метэстральные клетки Метэстральные  клетки - обычно крупнее промежуточных клеток. В их цитоплазме часто находят один или большее количество нейтрофилов. Метэстральные клетки, как правило, обнаруживаются в начале диэструса или в случаях вагинита. Очень редко такие клетки встречаются в начале проэструса .

 

 

Цитологические изменения влагалища сук на разных стадиях эстрального цикла.

 

Итак :

Одними из признаков дней, благоприятных для вязки являются:

• Изолированное расположение клеток на расстоянии друг от друга,или в виде черепицы, когда контуры одной клётки легко просматриваются сквозь прозрачную цитоплазму другой.
• Светлый прозрачный фон мазка при отсутствии лейкоцитов
• Клетки располагаются группами по 4-6 клеток или скоплениями.

 

Признаками окончания плодных дней являются:

• Постепенно начинает уменьшаться число поверхностных клеток и увеличивается число промежуточных клеток.
• Из-за изменения характера слизи и появления лейкоцитов мазок приобретает мутный, темноватый фон.
• Последующее уменьшение числа поверхностных клеток и увеличением числа промежуточных.

Ниже приведена информация по материалам книги “Английский бульдог” Бейли С. Хейнс
из серии: Библиотека Американского клуба собаководства.
“Наберитесь терпения и не торопитесь с вязкой. Лучше это сделать позже, чем раньше. Цель состоит в том, чтобы вязка произошла перед самым “выходом” суки из цикла
(до того, как в мазке вновь появятся круглые клетки с большими ядрами и лейкоциты). Если вы пропустили оптимальное для вязки время, возможно, будет не поздно вязать суку сразу же по наступлении выхода из цикла, хотя сука может и не принять кобеля при этом.
Пока сука не выйдет из цикла, вы не можете быть уверены, что провели вязку вовремя.
Если в период проэструса или вообще в течение цикла в мазке присутствует необычно большое количество лейкоцитов, у суки, вероятно имеется какая-то инфекция, хотя при этом при оптимальном для вязки периоде, мазок может выглядеть совершенно нормальным.
В то же время при наличии у суки инфекции нейтрофилы, промежуточные или парабазальные клетки часто могут появляться в неподобающие для себя сроки. “Группировка” безъядерных клеток не наблюдается, исследование вагинальных мазков становится малоэффективным.

Еще один метод состоит в том, чтобы вязать суку сразу после того, как анализ мазка засвидетельствует ее выход из цикла.

Следует обратить внимание на мазок инфицированной суки: некоторые клетки, хоть и безъядерные, но необычайно округлые. Кроме того бросается в глаза обилие лейкоцитов.
Имеется несколько типов лейкоцитов, но именно нейтрофилы чаще всего присутствуют в вагинальном мазке.
Следы лейкоцитов могут наблюдаться в период проэструса. Они появляются к концу течки - “на выходе”. Однако в период, наиболее оптимальный для вязки, лейкоцитов в мазке нет.
Эритроциты (красные кровяные клетки) могут присутствовать или отсутствовать на протяжении всего цикла и практически не влияют на результаты анализа мазка. Они очень малы по сравнению с лейкоцитами и при использовании метиленового синего практически не видны.”

 

 

Определение по прогестерону и лютеинизирующему гормону.

Рассмотрим способ при котором проводится контроль уровня гормона прогестерона и на основании полученных результатов планируются мероприятия по разведению.

Существует несколько видов гормонов, которые регулируют течку и беременность у собак.

К ним относятся:

•  Эстроген: стимулирует производство яйцеклеток.
•  Лютеинизирующий гормон (ЛГ): стимулирует выход яйцеклеток из яичников.
•  Прогестерон: поддержание беременности.

Изменение уровня гормонов может помочь в определении времени вязки и ожидании родов.
В каких случаях это необходимо?

• Если кобель находится в удаленном месте;
• Когда проводится искусственное осеменение;
• Когда предыдущая вязка не привела к беременности.

 

У собак овуляция происходит, когда уровень эстрогенов в крови снижается, а уровень прогестерона возрастает.
Уровень эстрогена дает возможность определить, когда у собаки начнется течка, но не дает возможности определить момент вязки.
Уровень прогестерона и лютеинизирующего гормона дает достоверную информацию о времени овуляции.Эти гормоны, также, помогут определить момент родов и запланировать заводчику родовспоможение или кесарево сечение.

Определение уровня Лютеинизирующего гормона (ЛГ).

ЛГ химически отличается у разных видов животных, поэтому проводится только в ветеринарных лабораториях, где есть в наличии тесты конкретно для собак.
Результаты как правило готовы в течение суток.
Тест на определение уровня лютеинизирующего гормона необходимо делать ежедневно, начиная с конца проэструса.
Всплеск уровня гормона длится только 24 часа, поэтому его повторяют ежедневно для того, чтобы поймать его.
Всплеск как правило происходит за 48 часов до овуляции.

Определение уровня прогестерона.

Результаты должны быть получены в течение 24 часов после сдачи крови.
Исследование уровня прогестерона можно проводить каждые 2-3 дня, начиная с 3-5 дня от начала течки:

•  начальный уровень прогестерона менее 3,18 нмоль /л (1,0 нг/мл) до дня всплеска лютеинизирующего гормона;
•  в день всплеска Лютеинизирующего гормона (ЛГ), концентрация уровня прогестерона поднимается до 6,36-9,54 нмоль/л (2-3 нг/мл);
•  на следующий день после пика Лютеинизирующего гормона (ЛГ) концентрация прогестерона составляет 9,54-12,72 нмоль/л (3-4 нг/мл);
•  овуляция происходит на уровне прогестерона 15,9 нмоль/л (5 нг/мл).

Сроки вязки.

При достижении уровня прогестерона 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) необходимо начать готовиться к вязке. Уведомить владельца кобеля или ветеринарного врача, который будет проводить искусственное осеменение.

Оптимальными сроки вязки:

• При достижении уровня прогестерона 15,9 нмоль/л (5 нг/мл), вязка осуществляется через 24-48 часов;
• Искусственное осеменение с помощью охлажденной спермы проводится через 4 дня после достижения уровня прогестерона 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 48 часов после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл);
•  Искусственное осеменение с помощью замороженной спермы выполняется через 5 дней после отметки 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 72 часа после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл).

Уровень прогестерона во время беременности.

После овуляции уровень прогестерона продолжает расти в течение 2-3 недель, в конечном итоге он достигает уровня 31,8-254,4 нмоль/л (10-80 нг/мл).
Этот уровень необходим для поддержания беременности и сохраняется у собак в течение 60 дней.
За 48 часов до родов показатель прогестерона начинает падать до уровня 6,36 нмоль/л (2 нг/мл), а за 24 часа до родов падает до 3,18 нмоль/л (1 нг/мл).
Это важно определить для проведения времени кесарева сечения, т.к. во время проведенная операция увеличивает выживаемость потомства.

Зачастую разные лаборатории используют различные единицы измерения прогестерона. В случае, если гормоны нужно сравнить с предыдущим показателем, сделанным в другой лаборатории, может возникнуть путаница. Поэтому внимательно посмотрите на единицу измерения, возьмите в руки калькулятор и вперед:
прогестерон
1 нг/мл = 1 мкг/л
1 нг/мл х 3,18 = 1 нмоль/л
1 мкг/л х 3,18 = 1 нмоль/л

Помним, что время оплодотворения яйцеклетки составляет 2-5 дней после овуляции.

Таблица показателей прогестерона в крови собаки.